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活性蛋白 | Toll樣受體2(TLR2)活性蛋白

Toll樣受體2(TLR2)是Toll樣受體家族中識(shí)別譜最廣的模式識(shí)別受體之一,作為先天性免疫應(yīng)答的“前沿哨兵”,在宿主防御病原體入侵中發(fā)揮核心作用。它通常以跨膜蛋白形式表達(dá)于免疫細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞)表面,其胞外區(qū)富含亮氨酸重復(fù)序列,可特異性識(shí)別病原體相關(guān)的保守分子模式。TLR2需與TLR1或TLR6形成異源二聚體以精確區(qū)分不同配體:TLR2/TLR1主要識(shí)別三酰脂蛋白,而TLR2/TLR6則靶向二酰脂蛋白。其配體涵蓋革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁成分(如脂蛋白、肽聚糖、脂磷酸酸)、真菌酵母聚糖及某些病毒包膜蛋白。當(dāng)配體結(jié)合后,TLR2通過胞內(nèi)TIR結(jié)構(gòu)域招募銜接蛋白MyD88,激活NF-κB和MAPK信號(hào)通路,驅(qū)動(dòng)促炎細(xì)胞因子(TNF-α、IL-6等)、趨化因子及抗菌肽的大量產(chǎn)生,從而啟動(dòng)炎癥反應(yīng)并橋接適應(yīng)性免疫。其活性異常與慢性炎癥性疾病(如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)、動(dòng)脈粥樣硬化及自身免疫病密切相關(guān),同時(shí)也是感染性疾病治療和疫苗佐劑開發(fā)的重要靶點(diǎn)。


○ 產(chǎn)品貨號(hào):APA663Hu02 

○ 活性驗(yàn)證

TLR2需與TLR1或TLR6及其他可能的輔助受體形成異源二聚體復(fù)合物發(fā)揮作用。這些復(fù)合物可識(shí)別革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、支原體和酵母菌的脂蛋白與糖脂——TLR2/TLR1異源二聚體結(jié)合三?;模鳷LR2/TLR6異源二聚體則優(yōu)先識(shí)別二?;?。通過功能性酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)重組人TLR2與重組人TLR1的相互作用:將TLR2用含0.01%牛血清白蛋白的PBS緩沖液(pH7.4)進(jìn)行梯度稀釋,取100μl重復(fù)樣本加入TLR1包被的微孔板中,37℃孵育1小時(shí)。經(jīng)PBST洗滌后,加入抗TLR2多克隆抗體孵育1小時(shí),棄液后洗滌3次。再加入HRP標(biāo)記的二抗孵育,經(jīng)5次洗滌后加入底物溶液,37℃顯色15-25分鐘。最終加入50μL終止液,立即于450nm波長(zhǎng)下讀數(shù)。如圖1所示,TLR2與TLR1的結(jié)合活性呈劑量依賴性,半數(shù)有效濃度(EC50)為0.21μg/ml。

○ 結(jié)果展示

Figure 1. The binding activity of TLR2 with TLR1