重癥肌無力(MG)是一種導(dǎo)致神經(jīng)肌肉接頭(NMJ)損傷的自身免疫性疾病，其特征是不同骨骼肌區(qū)域的運動時虛弱和易疲勞。MG自身免疫攻擊的自身抗體主要是靶向關(guān)鍵功能和結(jié)構(gòu)NMJ蛋白，包括乙酰膽堿受體(AChR)、肌肉特異性激酶受體(MuSK)或低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP4)。MG各種治療方法的引入改善了生存率和預(yù)后。然而，很大一部分患者是難治性或不耐受性的，MG治療的需求仍未滿足。近期，多篇文獻報道了MG相關(guān)研究，可能有助于MG新的治療方法的開發(fā)。

1. 胸腺瘤胸腺髓質(zhì)上皮細胞表達MG特異性異常神經(jīng)肌肉基因

MG通常伴有胸腺瘤，胸腺瘤相關(guān)MG因其頻繁出現(xiàn)危機、需要手術(shù)、圍手術(shù)期管理困難、需要強化免疫治療等原因，比其他形式的MG更難管理。然而，胸腺瘤患者并發(fā)MG的病因尚不清楚。通過使用大量和單細胞RNA測序構(gòu)建胸腺瘤的綜合圖譜，日本大阪大學(xué)醫(yī)學(xué)研究生院神經(jīng)內(nèi)科Tatsusada Okuno團隊確定了MG型胸腺瘤中神經(jīng)肌肉分子的異位表達^[1]。這些分子存在于髓質(zhì)胸腺上皮細胞(mTEC)的不同亞群中，他們將其命名為神經(jīng)肌肉mTEC(nmTEC)。MG胸腺瘤還表現(xiàn)出專門產(chǎn)生自身抗體的微環(huán)境，包括異位生發(fā)中心形成、T濾泡輔助細胞積聚和2型常規(guī)樹突狀細胞遷移(圖1)。細胞-細胞相互作用分析還預(yù)測了nmTEC和T/B細胞之間通過CXCL12-CXCR4的相互作用。免疫組織化學(xué)和MG胸腺瘤轉(zhuǎn)錄組的細胞組成估計進一步證實了MG胸腺瘤內(nèi)nmTEC呈遞神經(jīng)肌肉分子的富集。總之，這項研究表明，nmTEC通過神經(jīng)肌肉分子的異位表達在MG的發(fā)病機制中具有重要作用。

                                                                                                                          圖1.胸腺瘤的MG病理

2. 嵌合自身抗體受體T細胞精確靶向MuSK MG中的自身抗原特異性B細胞

MuSK-MG是一種自身免疫性疾病，由于抗MuSK自身抗體破壞神經(jīng)肌肉接頭信號，會導(dǎo)致危及生命的肌肉無力。為了避免當前療法的慢性免疫抑制，美國賓夕法尼亞大學(xué)佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院皮膚學(xué)系A(chǔ)imee S. Payne團隊改造T細胞表達具有CD137-CD3ζ信號結(jié)構(gòu)域的MuSK嵌合自身抗體受體(MuSK-CAART)，用于精確靶向表達抗MuSK自身抗體的B細胞^[2]。MuSK-CAART表現(xiàn)出與抗CD19嵌合抗原受體T細胞類似的作用，用于去除抗MuSK B細胞，并在可溶性抗MuSK抗體存在下保持細胞溶解活性(圖2)。在實驗性自身免疫性MG小鼠模型中，MuSK-CAART降低了抗MuSK IgG，而沒有降低B細胞或總IgG水平，反映了MuSK特異性B細胞的耗竭。這些數(shù)據(jù)有助于研究MuSK-CAART治療MuSK自身抗體陽性MG的新藥應(yīng)用和臨床研究設(shè)計。

                                                             圖2.通過BCR與MuSK-CAART靶向抗MuSK B細胞顯示出與抗CD19 CAR介導(dǎo)的細胞溶解相當?shù)寞熜?/p>

3. MG受體聚類和致病補體激活依賴于多個亞單位特異性抗體之間的協(xié)同作用

自身抗體可能干擾神經(jīng)傳遞的三種機制是：受體的直接拮抗、補體介導(dǎo)的突觸后膜的破壞和受體的增強內(nèi)化。瑞士巴塞爾大學(xué)生物醫(yī)學(xué)系Nicholas S. R. Sanderson從MG患者中分離出AChR特異性B細胞，并產(chǎn)生了六種重組抗體^[2]。所有AChR特異性抗體均高突變，包括同型IgG1、IgG3和IgG4，并識別AChR的不同亞單位。在體外神經(jīng)肌肉突觸模型中，單個抗體沒有顯示出對AChR的顯著拮抗作用，或AChR依賴的補體激活，并且在體內(nèi)沒有誘導(dǎo)肌無力癥狀。然而，抗體組合在體外誘導(dǎo)了強烈的補體激活，在被動轉(zhuǎn)移MG大鼠模型中引起嚴重虛弱，與肌肉中的NMJ破壞和補體激活有關(guān)(圖3)。最強烈的補體激活是由針對AChR不同亞單位的抗體組合介導(dǎo)的，這種組合也誘導(dǎo)了體外活細胞表面AChR簇的形成。他們認為不同表位特異性的抗體之間的協(xié)同作用是這種疾病的基本特征，也可能是補體介導(dǎo)的自身免疫性疾病的一般特征。針對不同受體亞基的抗體之間的協(xié)同相互作用的重要性可以解釋血清抗AChR滴度和臨床嚴重程度之間的差異，并對目前正在研究的治療策略有影響。

                                                                                                         圖3.抗體組合對被動轉(zhuǎn)移MG大鼠模型致病性的影響

參考文獻

[1]Yasumizu Y, Ohkura N, Murata H, et al. Myasthenia gravis-specific aberrant neuromuscular gene expression by medullary thymic epithelial cells in thymoma [J]. Nat Commun. 2022;13(1):4230. (IF=17.694)

[2]Oh S, Mao X, Manfredo-Vieira S, et al. Precision targeting of autoantigen-specific B cells in muscle-specific tyrosine kinase myasthenia gravis with chimeric autoantibody receptor T cells [J]. Nat Biotechnol. 2023;10.1038/s41587-022-01637-z. (IF=68.164)

[3]Rose N, Holdermann S, Callegari I, et al. Receptor clustering and pathogenic complement activation in myasthenia gravis depend on synergy between antibodies with multiple subunit specificities [J]. Acta Neuropathol. 2022;144(5):1005-1025. (IF=15.887)

云克隆不僅可提供多種自身免疫疾病動物模型，包括重癥肌無力、變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎、干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等，涵蓋常見自身免疫疾??；還具有各類自身免疫疾病檢測指標及上述AChR、MuSK、LRP4、CXCL12、CXCR4、CD19等相關(guān)產(chǎn)品，可助力廣大科研工作者進行自身免疫疾病研究。