血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2），一種機體內(nèi)關(guān)鍵的羧肽酶，通過靶向作用于血管緊張素I（Ang I）生成血管緊張素1-9（Ang1-9）、血管緊張素II（Ang II）及血管緊張素1-7（Ang 1-7）等有益的活性肽，保護心血管系統(tǒng)，調(diào)節(jié)血壓以及維持血管內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。隨著2003年非典型性肺炎（SARS）爆發(fā)，ACE2另一項重要功能被揭開面紗，作為SARS-CoV表面S蛋白受體（Imai等，2005；Kuba等，2005），能夠打開細胞的大門，幫助病毒侵入細胞。近期研究表明，肆虐全球的新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）因具有與SARS-CoV結(jié)構(gòu)類似的表面S蛋白，且具備與ACE2更高的親和力，更易依賴ACE2侵入機體（Walls等，2020；Wan等，2020；Wrapp等，2020）。在正常成人肺中，ACE2主要在肺泡上皮II型細胞中表達，其首先被病毒攻陷，可作為體內(nèi)的病毒庫（Zhao等，2020）。除了肺部，ACE2還能在多種組織中表達，包括心臟、腎臟和血管等多種肺外組織中表達（Crackower等，2002；Danilczyk和Penninger，2006；Ding等，2004；Gu等，2005；Hamming等，2004；Zhang等，2020）。ACE2在這些器官組織中的分布可能解釋了在病人體內(nèi)觀察到的多器官功能障礙。這些研究皆在指證ACE2是病毒在體內(nèi)傳播的幫兇。

Cell的最新研究：Inhibition of SARS-CoV-2 infection in engineered human tissues using clinical-grade soluble human ACE2 ，讓昔日的“幫兇”搖身一變成為“抗疫戰(zhàn)士”。研究團隊用不同數(shù)量的SARS-CoV-2感染Vero-E6細胞，通過qPCR測定細胞內(nèi)病毒RNA，發(fā)現(xiàn)重組人可溶性ACE2（hrsACE2）顯著抑制了SARS-CoV-2感染Vero-E6細胞。同時通過誘導(dǎo)多功能干細胞建立了人毛細血管類器官和腎類器官，發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2可直接感染人毛細血管類器官和腎類器官，且hrsACE2能顯著阻斷SARS-CoV-2的感染，這項研究為soluble ACE2既能保護肺部免受損傷又能阻斷SARS-CoV-2進入靶細胞提供了理論依據(jù)。由于研究聚焦感染的早期階段，僅僅證明hrsACE2在感染早期可阻止SARS-CoV-2感染宿主細胞，卻不能對hrsACE2在疾病后期的作用作出任何預(yù)測，且對于hrsACE2是否能抑制SARS-CoV-2的生長尚不清楚。繼續(xù)深入研究，或許還能解碼ACE2的其他身份。

云克隆推出了三大物種科研用ACE2活性蛋白產(chǎn)品，以期為助力科研盡綿薄之力。

云克隆ACE2相關(guān)活性蛋白產(chǎn)品

以人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2，ACE2（APB886Hu01）活性蛋白為例，活性驗證方案如下：

實驗原理：

SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白（SP）可通過結(jié)合宿主細胞表面血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）進入宿主細胞，本實驗通過結(jié)合ELISA檢測重組人ACE2和重組Spike 蛋白（SP）的相互作用。

實驗試劑：

APB886Hu01  Active Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

APX273Ge02  Active Spike Protein (SP)

PAB886Hu01  Polyclonal Antibody to Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

SAA544Rb19  HRP-Linked Caprine Anti-Rabbit IgG Polyclonal Antibody 

實驗方法：

用含有0.01% BSA的PBS（pH 7.4）梯度稀釋ACE2。將100μL樣品移入SP蛋白預(yù)包被酶標板中，37℃孵育2小時。棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗滌。除去洗液，加入抗ACE2 pAb孵育1小時，棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗板3次。用辣根過氧化物酶標記的二抗孵育后，棄去孔內(nèi)液體，用PBST洗板3次。加入底物溶液后，在37℃下孵育15-25分鐘。最后，向孔中加入50μL終止液，立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度。ACE2和SP的結(jié)合活性如圖1所示，這種作用呈劑量依賴性。

實驗結(jié)果：

圖1. 人ACE2與SP的結(jié)合活性

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