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S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A4 (S100A4)

S100-A4; MTS1; 18A2; 42A; CAPL; P9KA; PEL98; Calcium protein; Calvasculin; Metastasin; Protein Mts1; Placental calcium-binding protein; Murine placental homolog

  • S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)產品包裝(模擬)
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  • S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)實驗結果圖
  • SEC020Mi.jpg標準曲線圖
  • Certificate通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒對檢測S100鈣結合蛋白A4(S100A4)具有較高的靈敏度。
經檢測人、小鼠、大鼠之間有100%的交叉反映。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的S100鈣結合蛋白A4(S100A4)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本回收率范圍(%)平均回收率(%)
serum(n=5)97-105101
EDTA plasma(n=5)87-9491
heparin plasma(n=5)89-9692

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的S100鈣結合蛋白A4(S100A4),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中S100鈣結合蛋白A4(S100A4)含量的測定值與理論值的比率。

樣本1:21:41:81:16
serum(n=5)95-103%92-101%80-97%94-105%
EDTA plasma(n=5)91-104%83-93%80-94%88-101%
heparin plasma(n=5)78-101%91-102%86-94%81-91%

穩(wěn)定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。

實驗原理

將S100鈣結合蛋白A4(S100A4)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的S100鈣結合蛋白A4(S100A4)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的S100鈣結合蛋白A4(S100A4)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S100鈣結合蛋白A4(S100A4)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志參考文獻
Cell Death & DiseaseTunneling-nanotube direction determination in neurons and astrocytes[PubMed: PMC3542613]
CancersAn Integrated Bioinformatics Analysis Repurposes an Antihelminthic Drug Niclosamide for Treating HMGA2-Overexpressing Human Colorectal Cancer[Pubmed: 31581665]
BiologyThe Roles of S100A4 and the EGF/EGFR Signaling Axis in Pulmonary Hypertension with Right Ventricular Hypertrophy[Pubmed:35053115]
Expert Opinion on Therapeutic TargetsDapagliflozin mitigates ovalbumin-prompted airway inflammatory-oxidative successions and associated bronchospasm in a rat model of allergic asthma[Pubmed:35549595]