○ 產(chǎn)品貨號(hào)：APA128Ga01
TIMP2是一種分子量為22 kDa的非N-糖基化蛋白，可由多種細(xì)胞類型分泌，通過(guò)形成非共價(jià)二元復(fù)合物抑制MMPs活性。除抑制功能外，TIMP2還具有促紅細(xì)胞生成和細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)熒光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2（檢測(cè)緩沖液：50 mM Tris、10 mM CaCl2、150 mM NaCl、0.05% Brij-35，pH 7.5）評(píng)估重組雞源TIMP2（rgTIMP2，分子量23 kDa）對(duì)重組人源MMP2（rhMMP2）的抑制活性。具體步驟為：將100 μg/mL rhMMP2經(jīng)1 mM APMA于37℃活化1小時(shí)后，與系列濃度rgTIMP2（8 μL）及檢測(cè)緩沖液（59.2 μL）混合（對(duì)照組僅含緩沖液與rhMMP2），37℃孵育2小時(shí)。取50 μL五倍稀釋反應(yīng)液加入微孔板，加入50 μL 20 μM底物啟動(dòng)反應(yīng)（空白對(duì)照為50 μL緩沖液+50 μL底物），在320 nm激發(fā)波長(zhǎng)/405 nm發(fā)射波長(zhǎng)下進(jìn)行5分鐘動(dòng)力學(xué)檢測(cè)。如圖1所示，rgTIMP2可顯著抑制rhMMP2活性，其半數(shù)抑制濃度（IC50）小于16 nM。○ 結(jié)果展示
